Modelli cellulari e preclinici

La Core Facility di Cellular and Preclinical Models offre corsi introduttivi personalizzati per giovani studenti, che combinano formazione teorica e pratica. Questi corsi sono fondamentali per fornire ai ricercatori le competenze necessarie per utilizzare efficacemente le risorse e le metodologie della facility.
Dal punto di vista infrastrutturale, la facility dispone di numerosi spazi dedicati, tra cui sette stanze di coltura cellulare di livello di biosicurezza 1 (BSL-1) e quattro di livello 2 (BSL-2), garantendo la manipolazione sicura delle cellule in conformità agli standard di biosicurezza.
Per accedere a questi spazi, i nuovi utenti devono completare un corso introduttivo, superare una verifica delle competenze e accettare formalmente tutte le procedure operative previste.

Servizi principali offerti

• Gestione della Cell Bank Istituzionale: La facility gestisce una collezione di oltre 300 linee cellulari, prevalentemente tumorali, di origine umana e animale. Queste linee provengono da importanti banche internazionali (ATCC, DSMZ, NCI, ECACC) e sono disponibili per tutti i ricercatori IFOM.
• Caratterizzazione e Controllo Qualità delle Linee Cellulari: Ogni linea cellulare è sottoposta a controlli rigorosi, tra cui test per la rilevazione di Mycoplasma (test enzimatico e PCR), autenticazione tramite profilo STR, valutazione della curva di crescita e test di resistenza a farmaci di selezione (puromicina, igromicina, G418).
• Ottimizzazione di Protocolli di Trasfezione ed Elettroporazione: I protocolli vengono costantemente ottimizzati per le linee cellulari di uso frequente al fine di migliorarne l’efficienza e la riproducibilità.
• Controllo Qualità su Collezioni Private e Materiale Primario: Anche i campioni primari e le linee cellulari provenienti dai singoli gruppi di ricerca sono sottoposti a controlli qualità.
• Supporto per Cellule Staminali iPSC Umane: La facility supporta i gruppi di ricerca privi di esperienza nella manipolazione di cellule staminali, offrendo formazione o conducendo esperimenti su richiesta.
• Colture su Larga Scala e Selezione Clonale: Servizi per la coltura su larga scala di ibridomi e selezione clonale a seguito di trasfezione o trasduzione.
• Preparazione e Distribuzione di Mezzi e Reagenti: Selezione e test dei sieri per garantire la coerenza tra i lotti; i reagenti più comuni sono pre-aliquotati e stoccati in ogni stanza.
• Preparazione di Plasmidi per la Produzione Lentivirale: Preparazione e distribuzione dei plasmidi, oltre alla semina quotidiana delle cellule HEK293T per la produzione di lentivirus.
• Supporto Normativo: Assistenza nella compilazione delle notifiche MOMG al Ministero della Salute.

Ogni stanza dedicata alla coltura cellulare è dotata di 8-10 postazioni con cappe, 10-12 incubatori e può ospitare circa 20 ricercatori. Per la manipolazione di sostanze pericolose sono disponibili cappe citotossiche dedicate. Sono inoltre presenti aree di quarantena (cappe e incubatori) per le linee cellulari di nuova acquisizione e per materiale primario appena isolato. Per supportare un'ampia gamma di applicazioni nella coltura cellulare — dal conteggio di routine all’analisi in time-lapse e alla manipolazione cellulare avanzata — la Cellular and Preclinical Models Core Facility è dotata di strumenti all’avanguardia. Questa configurazione avanzata garantisce condizioni precise e riproducibili per la ricerca d’avanguardia in biologia del cancro e oltre.

• Contatori cellulari (Beckman Multisizer 2, Thermo Countess I & II, Logos Bios LUNA)
  Consentono una quantificazione accurata delle cellule e la valutazione della loro vitalità, garantendo risultati sperimentali riproducibili.
• Elettroporatori(Thermo NEON, Nepagene NEPA21)
  Facilitano l’introduzione di acidi nucleici o proteine nelle cellule mediante elettroporazione ad alta efficienza.
• Dissociatore di tessuti (Miltenyi GentleMACS Octo)
  Permette la dissociazione delicata e automatizzata dei tessuti in sospensioni monocellulari, fondamentali per applicazioni successive come il sorting e la coltura cellulare.
• Separatore magnetico di cellule (Miltenyi AutoMACS)
  Consente la separazione rapida ed efficiente di popolazioni cellulari specifiche per studi immunologici e molecolari.
• Sistema per analisi di cellule vive (Sartorius Incucyte S3 & S5)
  Fornisce immagini in tempo reale e analisi della proliferazione, morfologia e comportamento cellulare in condizioni controllate.
• Stazioni per ipossia (Don Whitley H45 & H135)
  Mantengono ambienti a basso contenuto di ossigeno per simulare condizioni fisiologiche o il microambiente tumorale, fondamentali per studi legati all’ipossia.

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